347 roestvrij staal chemische samenstelling De omvang van veneus of capillair bloed, specifiek voor SARS-CoV-2, T-celreacties bepaalt de immuniteit tegen COVID-19.

Bedankt voor uw bezoek aan Nature.com.U gebruikt een browserversie met beperkte CSS-ondersteuning.Voor de beste ervaring raden wij u aan een bijgewerkte browser te gebruiken (of de compatibiliteitsmodus in Internet Explorer uit te schakelen).Om voortdurende ondersteuning te garanderen, tonen we de site bovendien zonder stijlen en JavaScript.
Sliders met drie artikelen per dia.Gebruik de knoppen Vorige en Volgende om door de dia's te bladeren, of de knoppen op de schuifregelaar aan het einde om door elke dia te bladeren.

347 roestvrij staal chemische samenstelling

Roestvrij staal 347 spiraalbuis chemische samenstelling

De chemische samenstelling en mechanische eigenschappen van de RVS 347 spiraalbuis zijn als volgt:
- Koolstof – maximaal 0,030%
- Chroom – 17-19%
- Nikkel – 8-10,5%
- Mangaan – maximaal 1%

Roestvrij staal 347 Mechanische eigenschappen van spiraalbuis

Volgens de fabrikant van roestvrij staal 347 Coil Tube, mechanische eigenschappen van 347 Coil Tube:
- Treksterkte (psi) – 75.000 min
- Opbrengststerkte (psi) – 30.000 min
- Verlenging (% in 2″) – 25% min
- Brinell-hardheid (BHN) – maximaal 170

Toepassingen en gebruik van roestvrijstalen 347 spiraalbuis

• Roestvrij staal 347 spiraalbuis gebruikt in suikermolens.
• Roestvrij staal 347 spoelbuis gebruikt in kunstmest.
• Roestvrij staal 347 spiraalbuis gebruikt in de industrie.
• Roestvrij staal 347 spiraalbuis gebruikt in energiecentrales.
• Roestvrij staal 347 spiraalbuis gebruikt in voedingsmiddelen en zuivelproducten.
• Roestvrij staal 347 spiraalbuis gebruikt in olie- en gasfabrieken.
• Fabrikant van roestvrij staal 347 spiraalbuizen gebruikt in de scheepsbouwindustrie.

Er wordt aangenomen dat SARS-CoV-2-specifieke T-cellen beschermen tegen infectie en progressie van COVID-19, maar daar is geen direct bewijs voor.Hier vergeleken we volbloedmetingen van SARS-CoV-2-specifieke interferon-γ-positieve T-cellen met positieve diagnostische testresultaten voor COVID-19 (PCR en/of laterale flow) binnen 6 maanden na de bloedafname van Lian.Onder de 148 deelnemers die veneuze bloedmonsters doneerden, was de omvang van de SARS-CoV-2-specifieke T-celrespons significant hoger bij degenen die beschermd bleven dan bij degenen die geïnfecteerd waren (P <0,0001).% risico op infectie, terwijl hoge intensiteit dit risico reduceerde tot 5,4%.Deze resultaten werden gegeneraliseerd naar nog eens 299 deelnemers die een schaalbare capillaire bloedtest testten die de toegang tot T-celimmuniteitsgegevens op populatieschaal zou kunnen vergemakkelijken (14,9% versus 4,4%).De meting van T-cellen die specifiek zijn voor SARS-CoV-2 kan dus het risico op infectie voorspellen en moet worden geëvalueerd bij het monitoren van de individuele en populatie-immuunstatus.
Het meten en begrijpen van de immuunrespons op SARS-CoV-2-infectie is belangrijk om effectieve toekomstige strategieën te ontwikkelen om de volksgezondheids- en economische gevolgen van toekomstige COVID-19-uitbraken te minimaliseren.Identificatie van immuuncorrelaties zal belangrijke informatie opleveren over de gevoeligheid van een bevolking voor virale infecties, mogelijk een vroege waarschuwing voor piekopnames in het ziekenhuis, en mensen ook in staat stellen hun risico op infectie en het risico om anderen te infecteren persoonlijk te beheersen.Immuunsurveillance is van cruciaal belang gebleken voor het beoordelen van de effectiviteit van COVID-19-vaccins bij gezonde patiënten en patiënten met een hoog risico1,2,3, vooral bij SARS-CoV-24-mutanten, en de detectie van immuungecompromitteerde mensen zal de noodzaak betekenen om de immuniteit te versterken. Laat u vaccineren en voorkom toekomstige uitbraken.
Het niveau van immuniteit van een individu tegen SARS-CoV-2-infectie hangt af van meerdere factoren: virale last op het moment van blootstelling, virusvarianten, leeftijd, eerdere vaccinatie-/infectiestatus, comorbiditeiten, medicijnen en, belangrijker nog, anti-SARS-CoV-infectie .2 Een adaptieve immuunrespons vindt plaats op het moment van blootstelling aan het virus 5.Evaluatie van de immuunrespons op SARS-CoV-2-infectie en/of vaccinatie heeft zich geconcentreerd op serologische testen die de aanwezigheid meten van antilichamen die specifiek zijn voor een structureel eiwit (bijv. Spike-glycoproteïne).De aan- of afwezigheid van antilichamen alleen bepaalt echter niet nauwkeurig een beschermende immuunrespons, aangezien de reacties in de loop van de tijd aanzienlijk worden verzwakt6 en de neutralisatie van SARS-CoV-2-varianten bij herstellende of dubbel gevaccineerde individuen. Zwakke activiteit, die zou kunnen leiden tot een grote aantal doorbraakinfecties7.De bescherming tegen symptomatische COVID-19 veroorzaakt door de Omicron-variant (B.1.1.529) nam na slechts 4 tot 6 maanden mRNA-vaccinatie af tot ongeveer 10%, hoewel de bescherming tegen ernstige ziekten gedurende ten minste 7 maanden >68% aanhield8.Het meten van adaptieve geheugen-T-celreacties, die langdurige bescherming bieden tegen virale infecties, is de beste indicator voor de gevoeligheid voor SARS-CoV-2-infectie, en daarom een ​​betere indicatie van het risico om positief te testen op COVID-199, aangezien specifieke T-cellen cellen kunnen infectie voorkomen.zonder seroconversie10,11.Het meten van T-celreacties heeft echter minder aandacht gekregen vanwege methodologische problemen en logistieke problemen bij het verkrijgen en transporteren van veneuze bloedmonsters, vooral bij het uitvoeren van grote observationele onderzoeken om de werkzaamheid van vaccins te beoordelen en de immuniteit te monitoren.Gevaccineerde individuen vertonen echter robuuste T-celactiviteit tegen SARS-CoV-2-varianten, wat mogelijk het verlies aan antilichaamreactiviteit compenseert om de ernst van COVID-1912 te beperken,13.
Hier probeerden we te begrijpen of een enkele meting van de SARS-CoV-2 T-celrespons het absolute risico op SARS-CoV-2-infectie binnen zes maanden na bloedafname kon voorspellen, ongeacht eerdere immuunbeïnvloedende factoren.Om de T-celtest een hoge verwerkingscapaciteit te geven en toepasbaar te maken voor grotere onderzoeken, hebben we ook geprobeerd de test te verkleinen, zodat deze kan worden uitgevoerd met behulp van een capillair vingerprikbloedmonster.
We hebben de cellulaire en humorale immuunresponsen bij gezonde donoren gemeten met behulp van een gecombineerde detectie van SARS-CoV-2 T-cellen en IgG-antilichamen op basis van vol veneus bloed (voor deelnemerskenmerken, zie maart 2022 14). Bij gevaccineerde donoren is SARS-CoV-2- specifieke T-cellulaire reacties werden bepaald door het meten van plasma-interferon-γ (IFN-γ) niveaus na volbloedstimulatie met SARS-CoV-2-peptide (zoals eerder, ref. 14,15,16,17,18) en IgG-reacties geassocieerd met nucleocapside (N) waren verhoogd bij degenen die een eerdere infectie rapporteerden, hoewel beide reacties hoger waren bij eerder geïnfecteerde niet-gevaccineerde donoren, maximaal in het lichaam (Fig. 1a, b).IgG-reacties tegen piekglycoproteïnen (RBD, S1, S2) waren het hoogst bij eerder geïnfecteerde gevaccineerde donoren (Figuur 1c – e).
een SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celrespons werd gemeten door middel van een veneuze volbloedtest en gebaseerd op de vaccinaties van de deelnemers en de eerdere SARS-CoV-2-infectiestatus (bevestigd door PCR en/of laterale flowtest)' Vac + /Inf +' n = 60 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 82 (blauw), 'Vac-/Inf +' n = 4 (geel), 'Vac-/Inf-' n = 1 (niet toegepast).SARS-CoV-2-specifieke IgG-bindingsreacties richten zich op nucleocapside (“N”) (b; ****P < 0,0001, **P = 0,0016), verrijkt receptor-bindend domein (“RBD”) (c; ** P = 0,0022, *P < 0,015), pieksubeenheid 1 (“S1”) (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) en pieksubeenheid 2 (“S2”) (e) werd gemeten door veneuze volbloedtesten en gebaseerd op vaccinatie van de deelnemer en eerdere SARS-CoV-2 (bevestigd door PCR en/of of laterale flowtest) infectieuze status.'Vac + /Inf +' n = 60 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (blauw), 'Vac-/Inf +' n = 4 (geel).Vergelijkingen werden gemaakt met behulp van de Kruskal-Wallis-test, aangepast voor meerdere vergelijkingen met behulp van de Dunn-test.De gegevens worden weergegeven als diagrammen (middellijn op de mediaan, bovengrens op het 75e percentiel, ondergrens op het 25e percentiel) met snorharen op de minimum- en maximumwaarden.Elke stip vertegenwoordigt een donor.Ruwe gegevens worden aangeleverd in de vorm van ruwe databestanden.
Na de bloedafname werd de deelnemers gevraagd om zelf positieve PCR- en/of laterale flowtestresultaten voor COVID-19 te rapporteren;Als deelnemers tussen 1 september 2021 en 29 december 2021 positief testten, werd aangenomen dat ze na 29 december 2021 besmet waren met de Delta (B.1.617.2) variant coronavirus en Omicron (B.1.1.529) voor Public Health Wales. deze optie van zorg wordt dominant.Onder de 148 evalueerbare donoren hebben we binnen zes maanden na de bloeddonatie een infectiepercentage van 26,3% (39/148) waargenomen, van wie er 38 een tweede of derde dosis van het COVID-19-vaccin ontvingen (de doorbraak van de infectie vond plaats na Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) mRNA-vaccin of AstraZeneca-vaccin (ChAdOx1 nCoV-19));een niet-gevaccineerde donor was ook besmet.De omvang van SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ-positieve T-celreacties was significant lager bij degenen die een positieve diagnostische test voor COVID-19 rapporteerden dan bij niet-geïnfecteerde donoren (P <0,0001; Fig. 2a), voornamelijk als gevolg van optimale inductie van T-celreacties door vaccinatie bij sommige deelnemers (P = 0,050; aanvullende figuur 1).Er was geen correlatie tussen de omvang van de IFN-γ+ T-celrespons en de tijd tot een positief COVID-19-testresultaat (aanvullende figuur 2).Daarentegen waren noch RBD-, S1-, S2-bindende IgG-reacties (figuren 2b – d), noch RBD-, S1-neutraliserende antilichaamreacties specifiek voor wildtype of delta SARS-CoV-2 (B.1.617).) (aanvullende afbeelding 3) kan onderscheid maken tussen mensen die een risico lopen op infectie.Lage N-gekoppelde IgG-reacties tegen SARS-CoV-2 correleerden echter met het risico op COVID-19-infectie (P = 0,0084; Figuur 2e);degenen die positief testten hadden 85% minder kans (P = 0,00035; OF 0,15, 95).% BI: 0,047–0,39 (aanvullende figuur 4).
Veneuze bloedmonsters van gezonde donoren (n = 148) beoordeelden SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celreacties (a; ****P < 0,0001) en binding van de Spike-receptor aan de specifieke SARS-CoV -2 prikkel.domein (“RBD”) (b), piek 1 subeenheid (“S1″) (c), piek 2 subeenheid (“S2″) (d), en nucleocapside (“N”) (e; **P = 0,0084 ) .Deelnemers die positief testten op COVID-19 (PCR en/of laterale flow) geïdentificeerd;alle infecties vonden plaats binnen 6 maanden na de bloedafname.Vergelijkingen werden gemaakt met behulp van een tweezijdige Mann-Whitney-test.De gegevens worden weergegeven als diagrammen (middellijn op de mediaan, bovengrens op het 75e percentiel, ondergrens op het 25e percentiel) met snorharen op de minimum- en maximumwaarden.Elke stip vertegenwoordigt een donor.ns is niet belangrijk.De heatmap f toont de rangcorrelaties van Spearman tussen variabelen voor de opgegeven dataset.Vergelijkingen die niet statistisch significant waren, werden uitgesloten van de matrix en gemarkeerd met blanco cellen.Ruwe gegevens worden aangeleverd in de vorm van ruwe databestanden.
De vooraf ingestelde diagnostische positieve grenswaarde van 14 werd als te willekeurig beschouwd om het risico op herinfectie te beoordelen, dus werden interkwartielbereiken vastgesteld om absolute risicoparameters vast te stellen.Het statistische model, dat alleen variabelen omvatte die een significant effect hadden op de resultaten, toonde aan dat de omvang van de SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celrespons de belangrijkste immuunbiomarker was voor het bepalen van de kansen van een individu om besmet te raken. getest op COVID.-19 positief (figuur 2f en aanvullende figuur 4).Patiënten met een SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celrespons in het derde (194-489 pg/ml IFN-γ) en vierde (>489 pg/ml IFN-γ) kwartiel 65% (P = 0,055; OR 0,35, 95% BI: 0,11–1,00) en 90% (P = 0,0050; OR 0,098, 95% BI: 0,014–0,42) hadden meer deelnemers.De kansen zijn klein (aanvullende afbeelding 4).Over het geheel genomen hadden deelnemers met een SARS-CoV-2-specifieke T-celrespons uit veneus bloed ≤79 pg/ml IFN-γ een risico van 43,2% op een doorbraakinfectie na 6 maanden, vergeleken met een respons >489 pg/ml.ml IFN-γ had een risico op infectie van 5,4% (tabel 2).
Veneus volbloedonderzoek heeft een beperkte reikwijdte vanwege de noodzaak voor monsterafname door de flebotomist.Om de beschikbaarheid van T-cel- en IgG-testen voor SARS-CoV-2 te vergroten, is een alternatieve capillaire bloedafnamemethode ontwikkeld waarmee deelnemers thuis vingerprikbloedmonsters kunnen afnemen.Voor zover ons bekend zijn er geen eerdere rapporten geweest over het meten van antigeenspecifieke T-celfunctie in capillaire bloedmonsters.Er is eerder een sterke correlatie aangetoond tussen lymfocytentellingen verkregen met behulp van vergelijkbare capillaire en veneuze bloedmonsters.Bovendien is gemeld dat op volbloed gebaseerde tests die SARS-CoV-2-specifieke T-celreacties meten, slechts 320 μl veneus bloed gebruiken,20 waardoor zorgen over de frequentie van progenitor-T-cellen in capillaire bloedmonsters worden weggenomen.
We gebruikten deze gestandaardiseerde collaboratieve test met hoge doorvoer van SARS-CoV-2 T-cellen en IgG-antilichamen op basis van capillair volbloed om de cellulaire en humorale immuunrespons te meten bij deelnemers met verschillende comorbiditeiten en eerdere vaccinatie-/infectiestatus (Tabel 1).gerekruteerd uit heel Groot-Brittannië tussen 24 januari en 14 maart 202214. Het merendeel (90,9%) van de vingermonsters werd correct verkregen en binnen 24 uur na afname naar het laboratorium gestuurd.In sommige gevallen werden monsters binnen 48 uur na de bloedafname ontvangen, maar geen van deze monsters slaagde voor de kwaliteitscontroles en had geen invloed op de algehele T-cel- of antilichaammetingen (aanvullende figuur 5).Hoewel er bij sommige individuen verschillen waren in de omvang van de SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celrespons gemeten in respectievelijke capillaire en veneuze bloedmonsters, waren er over het geheel genomen geen significante verschillen (P = 0,88; aanvullende figuur 6). ).).
SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celreacties waren significant verhoogd bij gevaccineerde individuen die ook een eerdere infectie rapporteerden (P = 0,0001), maar niet significant hoger dan bij eerder geïnfecteerde niet-gevaccineerde donorindividuen (P = 0,19, Fig. 3a).).IgG-reacties tegen piekglycoproteïne (RBD, S1, S2) waren significant hoger bij gevaccineerde donoren dan bij niet-gevaccineerde donoren, ongeacht de eerdere infectiestatus (Figuur 3b-d).Interessant genoeg was de gemiddelde N-gebonden IgG-respons het hoogst bij eerder geïnfecteerde, niet-gevaccineerde deelnemers vergeleken met gevaccineerde deelnemers, hoewel dit geen significantie bereikte (Figuur 3e).Onder de niet-gevaccineerde en niet-geïnfecteerde donoren die dit zelf verklaarden, waren 15 van de 37 (40,5%) deelnemers positief voor N-gebonden IgG, boven de eerder vastgestelde drempel van 2,0 BAU/ml14;deze 15 deelnemers Twaalf van deze patiënten testten positief op IFN-γ+ T-celrespons boven de eerder vastgestelde drempel van 22,7 pg/ml IFN-γ14.Daarom is het waarschijnlijk dat deze deelnemers eerder besmet waren met SARS-CoV-2 en niet werden getest op COVID-19 vanwege persoonlijke keuze, gebrek aan PCR en/of laterale flowapparatuur, of asymptomatisch waren.Hoewel er een significante correlatie was tussen T-celreacties op IFN-γ+ en N-gekoppelde IgG-niveaus bij niet-gevaccineerde donoren (P = 0,0044; aanvullende figuur), daalde de N-gekoppelde IgG-respons sneller dan de N-gekoppelde IgG-respons, terwijl IFN-γ + De T-celreacties bleven behouden ongeacht de vaccinatiestatus, hoewel het aantal donoren 50 weken na de prikkeling laag was (aanvullende figuur 8). Het vaccinatietype verschilde over het algemeen weinig van de waargenomen IgG-reacties die specifiek zijn voor SARS-CoV-2, T cellen en RBD-geassocieerd, hoewel deelnemers die twee doses BNT162b2 kregen gevolgd door hervaccinatie met mRNA1273 significant hogere niveaus van IFN-γ + T-cellen vertoonden, gevoeliger waren voor SARS-CoV-2 dan degenen die twee doses ChAdOx1 en BNT162b2 kregen (aanvullende studies). Fig. 9) Bovendien vertoonden de gerapporteerde comorbiditeiten weinig verschil in de waargenomen T-celreacties vergeleken met gezonde donoren (aanvullende figuur 10).
een SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celrespons werd gemeten met een capillaire test in volbloed en was gebaseerd op de vaccinaties van de deelnemers en de eerdere SARS-CoV-2-besmettelijke status (bevestigd door PCR en/of laterale flowtest).'Vac + /Inf +' n = 42 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 158 (blauw), 'Vac-/Inf +' n = 33 (geel), 'Vac- /Inf-' n = 37 (grijs).****P < 0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac-/Inf-) P = 0,014 .SARS-CoV-2-specifieke IgG-bindingsreacties op het spike-receptorbindende domein (“RBD”) (b; ****P < 0,0001, ns: niet significant), spike-subeenheid 1 (“S1”) (c; * * **P < 0,0001, ns: niet significant), spike-subeenheid 2 (“S2″) (d; ****P < 0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016) en nucleocapside (“N”) (e; ****P < 0,0001, ns niet significant) werden gemeten met behulp van veneuze volbloedanalyse en op basis van de vaccinaties van de deelnemers en eerdere SARS-CoV-2 (bevestigd door PCR en/of laterale flowanalyse). Infecties werden onderverdeeld naar toestand.'Vac + /Inf +' n = 46 (groen), 'Vac + /Inf-' n = 182 (blauw), 'Vac-/Inf +' n = 34 (geel), 'Vac-/Inf-' n = 37 (grijs).Vergelijkingen werden gemaakt met behulp van de Kruskal-Wallis-test, aangepast voor meerdere vergelijkingen met behulp van de Dunn-test.De gegevens worden weergegeven als diagrammen (middellijn op de mediaan, bovengrens op het 75e percentiel, ondergrens op het 25e percentiel) met snorharen op de minimum- en maximumwaarden.Elke stip vertegenwoordigt een donor.Ruwe gegevens worden aangeleverd in de vorm van ruwe databestanden.
Net als voorheen werd deelnemers gevraagd positieve PCR- en/of laterale bloedstroomresultaten voor COVID-19 te rapporteren;Volgens de UK Health Agency werd aangenomen dat de deelnemers besmet waren met het Omicron-coronavirus (B.1.1.529) op het moment dat de positieve virusvariant werd getest, aangezien dit tijdens de onderzoeksperiode de dominante variant in Groot-Brittannië was.Onder de 299 evalueerbare donoren observeerden we binnen drie maanden na capillaire donatie een infectiepercentage van 8,0% (24/299), waarvan er zeven niet waren gevaccineerd.Het aandeel comorbiditeiten onder alle deelnemers was lager bij degenen die positief testten op COVID-19 (10,7%) dan bij degenen die negatief testten op COVID-19 (24,4%, tabel 1), wat te wijten kan zijn aan het feit dat deelnemers met bepaalde ziekten zijn voorzichtiger en beschermen tegen mogelijke gevolgen zoals diabetes en kanker.Zoals waargenomen in een veneus bloedcohort, zijn SARS-CoV-2-specifieke interferon-γ (IFN-γ)-positieve T-cellen gemeten in capillaire bloedmonsters van personen die een positieve diagnostische test voor COVID-19 rapporteerden.De responsgrootte was significant lager dan bij niet-geïnfecteerde donoren (P = 0,034; Figuur 4a) vanwege de relatief slechte inductie van een T-celrespons door vaccinatie en/of eerdere infectie (aanvullende figuur 11).Op dezelfde manier waren noch RBD-, S1-, S2-bindende IgG-reacties (figuren 4b – d) noch RBD-, S1-neutraliserende antilichaamreacties specifiek voor wildtype of delta SARS-CoV-2 (B. 1.617).(Aanvullende figuur 12).Individuen met een aanzienlijk risico op infectie kunnen worden geïdentificeerd.In tegenstelling tot het veneuze cohort differentiëren N-gerelateerde IgG-reacties ook niet het risico op COVID-19 (Figuur 4e), wat suggereert dat de Omicron-variant (B.1.1.529) de immuunontduiking bij eerder geïnfecteerde individuen verhoogt, zoals onlangs beschreven21. Daarentegen was de sterkte van de SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ T-celrespons opnieuw de belangrijkste variabele bij het bepalen van de individuele kans om positief te testen op COVID-19 (Figuur 4f).Over het geheel genomen hadden deelnemers met een SARS-CoV-2-specifieke capillaire T-celrespons ≤23,7 pg/ml IFN-γ een risico van 14,9% op infectie na drie maanden, vergeleken met een respons >141,6 pg/ml.ml IFN.-γ had een infectierisico van 4,4% (Tabel 2).
IFN-γ+ T-celreacties specifiek voor SARS-CoV-2 (a; *P = 0,034) en SARS-CoV-2-specifiek IgG-gericht receptorbindend domein (“RBD”) (b), spike-subeenheid 1 (' S1 ′) (c), spike-subeenheid 2 ('S2') (d) en nucleocapside-bindingsreactie ('N') (e).Deelnemers geïdentificeerd als positief voor COVID-19-tests (PCR en/of laterale bloedstroomtest), alle infecties vonden plaats binnen 3 maanden na de bloedafname.Vergelijkingen werden gemaakt met behulp van een tweezijdige Mann-Whitney-test.De gegevens worden weergegeven als diagrammen (middellijn op de mediaan, bovengrens op het 75e percentiel, ondergrens op het 25e percentiel) met snorharen op de minimum- en maximumwaarden.Elke stip vertegenwoordigt een donor.ns is niet belangrijk.De heatmap f toont de rangcorrelaties van Spearman tussen variabelen voor de opgegeven dataset.Vergelijkingen die niet statistisch significant waren, werden uitgesloten van de matrix en gemarkeerd met blanco cellen.Ruwe gegevens worden aangeleverd in de vorm van ruwe databestanden.
Nu we de volgende fase van de COVID-19-pandemie ingaan, zal de focus verschuiven van preventie naar individueel risicobeheer en het identificeren van kwetsbare leden van de samenleving.Het vaststellen van de immuniteit tegen COVID-19 is van cruciaal belang om deze risicogroepen effectief te identificeren en te behandelen.Er zijn nu steeds meer aanwijzingen dat T-celimmuniteit beschermt tegen SARS-CoV-2-infectie en de ernst van COVID-1910 beperkt.De hier gepresenteerde gegevens tonen aan dat de gecombineerde kracht van SARS-CoV-2-specifieke IFN-γ+ T-celreacties tegen spike-, membraan- en nucleocapside-structurele eiwitten een grotere bescherming bieden tegen COVID-19 dan antilichaambinding.19 reacties bevorderen of neutraliseren .Hiermee moet rekening worden gehouden bij het beoordelen van de individuele immuniteit en/of de immuniteit van de kudde.RNA-virussen zoals SARS-CoV-2 of influenza A-virus (IAV) vermijden serologische neutralisatie door snel evoluerende blootgestelde B-cel-epitopen op oppervlakte-antigenen die door antilichamen worden herkend.De beschermende immuunrespons die door T-cellen wordt geleverd, kan het richten van epitopen uit meer geconserveerde gebieden van virale eiwitten weerspiegelen die niet snel aan een immuunrespons kunnen ontsnappen.T-cel-gemedieerde bescherming tegen nieuwe SARS-CoV-2-varianten is vergelijkbaar met de heterosubtypische bescherming die wordt gemedieerd door T-cel-targeting van geconserveerde intrinsieke eiwitten die wordt gezien in IAV22,23-subtypen.
Ondanks het enorme potentieel voor het meten van de cellulaire immuunrespons op COVID-19, is er relatief weinig aandacht besteed aan de ontwikkeling van nauwkeurige, gestandaardiseerde T-celtests met hoge doorvoer.De traditionele complexiteit en kosten die gepaard gaan met het meten van T-celreacties verhinderen de nauwkeurige bepaling van T-celimmuniteit bij het screenen op immuniteit van grote populaties.Hoewel onlangs verschillende commerciële peptidestimulatietests met volbloed beschikbaar zijn gekomen, heeft iedereen momenteel een flebotomist nodig om bloed te verkrijgen, waardoor de beschikbaarheid en de schaal beperkt zijn.Capillaire bloedsystemen worden veel gebruikt om de prevalentie van SARS-CoV-2-antilichamen in een populatie te bepalen.We hebben capillaire bloedtesten aangepast om peptidestimulatietesten in volbloed uit te voeren om de reactiviteit van T-cellen op structurele SARS-CoV-2-eiwitten en SARS-CoV-2-specifieke antilichaamreacties te beoordelen.In feite is de gecombineerde meting van SARS-CoV-2-specifieke antilichamen en T-cellen in hetzelfde capillaire bloedmonster zeer aantrekkelijk: (i) vermindert de noodzaak van meerdere bloedtesten per deelnemer, (ii) verbetert de ervaring en het begrip van de deelnemers;(iii) de logistiek verbeteren en dubbel werk verminderen, (iv) de impact op het milieu verminderen omdat er minder laboratoriumbenodigdheden en monsteraflevering nodig zijn.Hoewel de algehele IFN-γ-reactiviteit vergelijkbaar was tussen gematchte veneuze en capillaire bloedmonsters, werd waargenomen dat deze lager was in het capillaire bloedcohort van deelnemers (Fig. 4a) vergeleken met het veneuze bloedcohort (Fig. 2a).IFN-γ-waarden Er zijn verschillende verklaringen voor deze bevinding, namelijk dat een groot aantal deelnemers met comorbiditeiten die immunosuppressieve therapie vereisen, werd gerekruteerd in het cohort voor capillaire bloedafname (Tabel 1). De levensvatbaarheid en/of functie van T-cellen verkregen uit vasculaire monsters kunnen laag zijn, vooral als rekening wordt gehouden met de omstandigheden van langdurige opslag van monsters vóór peptidestimulatie.
Het momenteel algemeen verkrijgbare COVID-19-vaccin biedt voor de meeste ontvangers binnen zes maanden na vaccinatie de beste bescherming tegen ernstige ziekten8.Het is bemoedigend dat, ondanks de slechte door vaccins geïnduceerde serologische neutralisatie van SARS-CoV-26,7-varianten, de door vaccinatie tegen wildtype SARS-CoV-2 opgewekte T-celreacties zeer reactief bleven, terwijl er 25 andere naar voren kwamen.De gegevens die we hier presenteren tonen het belang aan van een bredere beoordeling van de immunogeniciteit van vaccins, waarbij de nadruk wordt gelegd op vaccins met onvoldoende T-celimmuniteit om plotselinge infectie en aanhoudende overdracht van het virus te voorkomen.We hebben ook waargenomen dat veel niet-gevaccineerde individuen die in het capillaire cohort waren gerekruteerd, een significante respons vertoonden van SARS-CoV-2-specifieke T-cellen (en N-bindend IgG), ongeacht eerdere vaccinatie, wat waarschijnlijk te wijten is aan een eerdere infectie.In plaats van geschikte personen te vaccineren, moet hun risico op infectie worden beoordeeld op basis van hun huidige immunisatiestatus en de weloverwogen keuzes die zijn gemaakt.
Beperkingen van dit onderzoek zijn onder meer de zekerheid dat deelnemers zelf een infectie met SARS-CoV-2 rapporteerden na bloedafname om de relevantie van immuniteit te bepalen;sommige deelnemers hebben mogelijk een asymptomatische infectie en kunnen geen PCR- en/of laterale flowtests voor COVID-19 ondergaan.Onze dataset ontbeerde ook informatie over de medicijnen van de deelnemers op het moment van de bloedafname.Omdat al onze deelnemers slechts milde/matige symptomen of geen symptomen meldden, was het bovendien niet mogelijk om uit onze dataset immuunreacties te identificeren die een verhoogd risico op ernstige ziekte en ziekenhuisopname voor COVID-19 voorspelden.De aanwezigheid van CD8+ T-celreacties tegen nucleocapside-specifieke epitopen is onlangs echter in verband gebracht met bescherming tegen ernstige COVID-1926.Bovendien heeft de hier gebruikte test geen T-celreacties gemeten op specifieke vroeg tot expressie gebrachte niet-structurele SARS-CoV-2-eiwitten waarvan onlangs is aangetoond dat ze zich bij voorkeur ophopen bij seronegatieve gezondheidszorgwerkers die in contact zijn geweest met geïnfecteerde patiënten.Op basis van dit werk lijkt het aantal SARS-CoV-2-specifieke T-cellen dat in onze tests wordt aangetroffen, gezien de prevalentie van overdracht door de gemeenschap op het moment van rekrutering en de grote waarschijnlijkheid van contactinfectie in de bevolking, ook in staat te zijn te verdwijnen.subklinische infecties in onze cohorten.Ten slotte hebben we de productie van interleukine 2 door T-cellen niet gemeten, omdat ons eerdere werk een slechte identificatie van SARS-CoV-214-specifieke T-celreacties aantoonde, hoewel IL-2-specifieke reacties kunnen duiden op reeds bestaande kruisreactiviteit.cellen geassocieerd met verdediging tegen SARS-CoV-211-infectie.
Alles bij elkaar benadrukken deze gegevens de fundamentele behoefte aan longitudinale langetermijnstudies waarin SARS-CoV-2-specifieke T-celreacties worden geïntegreerd in metingen van immuniteit op populatieschaal.Deze inspanningen kunnen worden ondersteund door de ontwikkeling van een nieuwe capillaire bloedtest die de T-celrespons meet.
Het onderzoeksproject rekruteerde deelnemers van februari 2021 tot maart 2022. Het cohort gezonde donoren (n = 148) die veneuze bloedmonsters doneerden, bestond voornamelijk uit universitair personeel en studenten die deelnamen aan de COVID-19-screeningdienst van Cardiff University of personeel van een basisschool in Cardiff.Alle deelnemers waren verder gezond en rapporteerden niet dat ze immunosuppressiva gebruikten (zie Tabel 1 voor kenmerken).Tot de groep deelnemers die capillaire bloedmonsters doneerden, behoorden alle vrijwillige donoren (18 jaar en ouder) uit het hele Verenigd Koninkrijk.Tussen 24 januari en 14 maart 2022 namen 342 deelnemers deel aan het onderzoek, van wie er 299 bloedmonsters naar het laboratorium stuurden.Veel deelnemers waren nog steeds niet gevaccineerd en/of rapporteerden ernstige comorbiditeiten, waaronder auto-immuunziekten en kanker (zie Tabel 1 voor kenmerken).Deze studie kreeg ethische goedkeuring van de Newcastle and North Tyneside 2 Research Ethics Committee (ID IRAS: 294246) en de Cardiff University School of Medicine Research Ethics Committee (SREC ref: SMREC 21/01).Alle deelnemers gaven vóór opname schriftelijke geïnformeerde toestemming.Deelnemers ontvingen geen vergoeding voor deelname aan dit onderzoek.
Veneuze bloedmonsters werden verkregen door venapunctie in 6 of 10 ml lithium- of natriumheparinevacutainers (BD).Capillaire bloedmonsters werden verkregen met een vingerlancet en vervolgens verzameld in heparine-microcontainers (BD).Er is minimaal 400 µl bloed vereist;elk monster van minder dan dit bedrag wordt afgewezen.Andere redenen voor monsterafstoting waren onder meer massale coagulatie en/of hemolyse en het onvermogen om viskeus plasma te verzamelen voor analyse (aanvullende figuur 5).Er waren in totaal 299 capillaire bloedmonsters beschikbaar voor het beoordelen van antilichaamreacties, waarvan 270 monsters ook beschikbaar waren voor het beoordelen van T-celreacties.
SARS-CoV-2-specifieke T-celreacties werden beoordeeld met behulp van de COVID-19 Immuno-T-assay (ImmunoServ Ltd) en uitgevoerd zoals eerder beschreven14.In het kort werd bij elke deelnemer één veneuze vacutainer van 6 ml of 10 ml natriumheparine (BD) afgenomen en binnen 12 uur na de bloedafname in het laboratorium verwerkt.Hoewel de meeste monsters binnen 24 uur werden verwerkt, werd binnen 48 uur na de vingerprikafname één 400-600 μl gehepariniseerd microbloedend (BD) capillair bloed verzameld.Veneuze en/of capillaire bloedmonsters werden gestimuleerd met afzonderlijke peptidepools specifiek voor SARS-CoV-2 (wildtype variant) zoals eerder beschreven14.Deze peptidebibliotheek bevat 420 15-meersequenties met 11 overlappende aminozuren die het gehele spike-eiwit (S1 en S2) (S; NCBI-eiwit: QHD43416 1), nucleocapsidefosfoproteïne (NP; NCBI-eiwit: QHD43423 2) en membraanglycoproteïne (M NCBI-eiwit: QHD43419 1) coderende sequenties (aangeduid als “S-/NP-/M-combinatoriële peptidebibliotheek”).Alle peptiden werden gezuiverd tot >70%, opgelost in steriel water en gebruikt in een eindconcentratie van 0,5 μg/ml per peptide.Monsters werden 20-24 uur bij 37°C geïncubeerd.De buizen werden vervolgens gedurende 3 minuten bij 5000 x g gecentrifugeerd en ongeveer 150 µl plasma werd uit de bovenkant van elk bloedmonster verzameld.Bewaar plasmamonsters maximaal één maand bij -20 °C voordat u cytokine-/antilichaamdetectietests uitvoert.
IFN-y werd gemeten met behulp van de IFN-y ELISA MAX Deluxe Set (BioLegend, catalogusnummer 430116) en uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant.Onmiddellijk nadat de stopoplossing (2N H2SO4) was toegevoegd, werd de microplaat afgelezen bij 450 nm met behulp van een BioLegend Mini ELISA-plaatlezer.IFN-γ werd gekwantificeerd door standaardcurve-extrapolatie met behulp van GraphPad Prism.Waarden onder de onderste detectielimiet van de test werden geregistreerd als 7,8 pg/ml, waarden boven de bovenste detectielimiet van de test werden geregistreerd als 1000 pg/ml.
Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG-antilichamen werden gemeten met behulp van een Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-plex panel (Bio-Rad, cat.nr. 12014634) en gelabeld volgens gebruiksaanwijzing .instructies.Monsters die waarden rapporteerden boven de kwantificeringslimiet werden opnieuw geanalyseerd bij een verdunning van 1:1000.De gemiddelde fluorescentie-intensiteit van de kralen werd gemeten op een Bio-Plex 200-instrument (Bio-Rad).Antilichaamconcentraties werden berekend met de VIROTROL SARS-CoV-2 single control assay (Bio-Rad) en omgezet naar WHO/NIBSC 20/136 International Reference Standard Units (BAU/ml) met behulp van de kalibratiefactor van de fabrikant.
RBD- en S1-subeenheidspecifieke neutraliserende antilichamen tegen SARS-CoV-2 wildtype en delta (B.1.617) SARS-CoV-2-lijnen werden gemeten met behulp van de Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 Variant Neutralization Antibody Kit (Bio -Rad, onderdeelnr. 12016897), volgens de instructies van de fabrikant.Meet de gemiddelde fluorescentie-intensiteit op de Bio-Plex 200 (Bio-Rad) en bereken het percentage remming (dwz neutralisatie) met behulp van de volgende formule:
Infectieuze neutralisatietests voor SARS-CoV-2 werden uitgevoerd zoals eerder beschreven28.In het kort werd 600 PFU wildtype SARS-CoV-2 geïncubeerd met drievoudige seriële verdunningen van plasma in tweevoud gedurende 1 uur bij 37°C.Het mengsel werd vervolgens gedurende 48 uur aan VeroE6-cellen toegevoegd.Monolagen werden gefixeerd met 4% paraformaldehyde, gepermeabiliseerd met 0,5% NP-40 en gedurende 1 uur geïncubeerd in blokkeerbuffer (PBS met 0,1% tween en 3% magere melk).Primair antilichaam (anti-nucleocapside 1C7, Stratech) werd gedurende 1 uur bij kamertemperatuur aan blokkeerbuffer toegevoegd.Na wassen werd een secundair antilichaam (anti-muis IgG-HRP, Pierce) gedurende 1 uur aan de blokkeerbuffer toegevoegd.Monolagen werden gewassen, ontwikkeld met behulp van Sigmafast OPD en afgelezen op een Clariostar Omega plaatlezer.Putjes zonder virus, zonder virus maar zonder antilichamen, en genormaliseerde sera die intermediaire activiteit vertoonden, werden als controles in elk experiment opgenomen.
Statistische analyse werd uitgevoerd in GraphPad Prism (versie 9.4.1).De normaliteit van de dataset werd getest met behulp van de Shapiro-Wilk-test.Voor alle vergelijkingen werden niet-parametrische criteria gebruikt.Voor ongepaarde monsters werd de Mann-Whitney-test gebruikt.Alle tests waren tweezijdig met een nominale significantiedrempel van P ≤ 0,05.
De eerste verkennende analyse van de dataset werd uitgevoerd in R (versie 4.0.3).Dit omvat de ontwikkeling van Spearmans univariate rangcorrelatiematrix, waarbij de correlatie tussen twee variabelen wordt weergegeven door de grootte en kleur van de vierkanten.De statistische significantie tussen associaties werd berekend met behulp van Spearman's rho, waarbij waarden ≤0,05 als significant werden beschouwd.Vergelijkingen die niet statistisch significant waren, werden uitgesloten van de matrix en gemarkeerd met blanco cellen.P-waarden werden aangepast voor meerdere vergelijkingen met behulp van de correctie van Holm.Er werd een binair logistisch regressiemodel gebruikt om het effect van variabelen in de dataset op de positieve respons op COVID-19 te simuleren.IFN-γ T-celreacties en anti-RBD/S1/S2/N IgG-titerscores werden omgezet in factoren, waarbij elk individu voor elke score aan het juiste kwartiel werd toegewezen.Daarna werd een eerste onderzoeksmodel ontwikkeld met behulp van de glm-functie in het statistische pakket (V4.0.3).De oddsratio's afgeleid van dit originele model werden geëxtraheerd uit de coëfficiënten van het model met behulp van de functie 'odds_plot' in het OddsPlotty-pakket (V1.0.2).Bij het ontwikkelen van het kruisvalidatiemodel hebben we de “bestglm”-functie uit het bestglm-pakket (V0.37.3) gebruikt om gebruikersvooroordelen te beperken en ervoor te zorgen dat de beste subset van voorspellers kan worden geselecteerd.De gekozen methode was “exhaustief” en het informatiecriterium dat werd gebruikt om de geschiktheid van het model te beoordelen was AIC.Dezelfde workflow die hierboven werd beschreven, werd gebruikt om de oddsratio te verkrijgen.
Voor meer informatie over het ontwerp van onderzoeken, zie de Nature-studiesamenvatting die bij dit artikel is gelinkt.
Brieven en verzoeken om materiaal moeten worden gericht aan Dr. Martin Scarr of Professor Andrew Godkin.Dit artikel bevat de originele gegevens.
De R-code die wordt gebruikt om statistische modellen te maken, is zonder verzoek openbaar beschikbaar29.Informatie over herdrukken en licenties zijn te vinden op www.nature.com/reprints.
Munro, APS et al.Veiligheid en immunogeniciteit van zeven COVID-19-vaccins als derde dosis (booster) na twee doses ChAdOx1 nCov-19 of BNT162b2 (COV-BOOST) in het VK: een fase 2, geblindeerde, multicentrische, gerandomiseerde, gecontroleerde studie.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV et al.Immunogeniciteit, veiligheid en reactogeniciteit van heterologe primaire vaccinatie tegen COVID-19 (Com-COV2) met behulp van mRNA, virale vectoren en eiwitadjuvante vaccins in het Verenigd Koninkrijk: een fase 2, enkelblinde, gerandomiseerde studie, non-inferioriteitstest.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB et al.Werkzaamheid van COVID-19-vaccins bij patiënten met een verzwakt immuunsysteem: een systematische review en meta-analyse.BMJ376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.Verminderde neutralisatie van SARS-CoV-2 micron variant B.1.1.529 door serum na immunisatie.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y en Baliser RD Doorbraakinfectie bij met SARS-CoV-2 gevaccineerde individuen: meting, oorzaken en gevolgen.Nationale priester van de immunologie.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG et al.Verzwakte immuun-humorale respons op het BNT162b2 Covid-19-vaccin gedurende 6 maanden.N. ing.J. Geneeskunde.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.Activiteit van herstellende en vaccinsera tegen SARS-CoV-2 Omicron.Natuur 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.Duur van de bescherming van het Qatarese mRNA-vaccin tegen SARS-CoV-2 Omicron BA.1- en BA.2-subvarianten.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ et al.De frequentie van geheugen-B-cellen neemt af door de doorbraak van de infectie met het COVID-19-deltavaccin.Moleculaire Geneeskunde EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. et al.Kruisreactieve geheugen-T-cellen worden in verband gebracht met de bescherming van COVID-19-contacten tegen SARS-CoV-2-infectie.Nationale gemeente.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH et al.Onderscheidende SARS CoV-2-omicron-reactieve T-cel- en B-celreacties bij ontvangers van het COVID-19-vaccin.de wetenschap.Immunologie.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu et al.Overgeërfde SARS-CoV-2-specifieke T-cellen herkennen Omicron-varianten kruislings.Nationale geneeskunde.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ et al.Meting van SARS-CoV-2-specifieke T-cellen uit volbloed onthult asymptomatische infectie en vaccinimmunogeniciteit bij gezonde individuen en patiënten met solide orgaankanker Immunologie https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.Snelle meting van SARS-CoV-2-piek-T-cellen in volbloed van gevaccineerde en natuurlijk geïnfecteerde personen.J. Klinisch.investeren.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.COVID-19-vaccinrespons bij patiënten met multiple sclerose.installeren.Neuronen.91, 89–100 (2022).
Bradley RE et al.Aanhoudende COVID-19-infectie met het Wiskott-Aldrich-syndroom verdween na therapeutische vaccinatie: een casusrapport.J. Klinisch.Immunologie.42, 32–35 (2022).